银杏叶发酵制备复合酶饲料添加剂工艺研究.doc

摘要:以银杏叶为原料，黑曲霉为菌种，固态发酵生产饲料添加剂,对培养基的成分和发酵条件进行了优化，确定了最佳发酵工艺参数，对发酵产物中主要营养成分和活性成分进行分析。结果表明,适宜的工艺参数为：1.5%的葡萄糖作为碳源，2.5%的氯化铵作为氮源，在含水量65%，发酵温度30℃，培养基初始pH为4，装瓶量12g的条件下发酵120h，可获得较好的发酵结果，CMC酶活最高可达10.27U。在对发酵产物主要营养成分和生物活性成分分析后发现蛋白质的含量由原先的14.28%增加到22.26%，槲皮素、山奈酚、异鼠李素、内酯的提取率都有相应的增加。由此可以看出银杏叶通过生物转化后营养丰富，生物活性增强。从而为复合型、多功能型银杏叶生物饲料添加剂的深入研究和开发打下了基础。

关键词 银杏叶；固体发酵；还原糖；纤维素酶活力；发酵条件

目录

摘要

Abstract

1 绪论-3

1.1 银杏叶的组成及其功效-3

1.1.1 银杏叶的化学成分-3

1.1.2 银杏叶的医药功效-5

1.2 黑曲霉-5

1.3 微生物饲料添加剂-6

1.3.1 微生物饲料添加剂的种类-6

1.3.2 微生物饲料添加剂的作用-6

1.4 银杏叶用于生物饲料的应用前景-7

1.5 本实验研究的目的和意义-8

2 实验材料与方法-9

2.1 菌种-9

2.2 主要仪器-9

2.3 主要试剂-9

2.4 培养基-10

2.4.1 种子培养基-10

2.4.2 固体发酵培养基-10

2.5 培养方法-10

2.5.1 菌种活化-10

2.5.2 固体发酵-11

2.6 分析测定方法-11

2.6.1还原糖含量和纤维素酶活力的测定方法-11

2.6.2 黄酮含量测定方法-13

2.6.3 内酯含量测定方法-15

2.6.4 蛋白质含量测定方法-16

2.7 固体发酵培养基的优化-16

2.7.1 不同碳源对产酶的影响-16

2.7.2 碳源添加量对产酶的影响-17

2.7.3 不同氮源对产酶的影响-17

2.7.4 氮源添加量对产酶的影响-17

2.8 固体发酵条件的优化-17

2.8.1 固体发酵条件的优化的单因素试验-17

2.8.2 固体发酵条件优化的正交试验-18

2.8.3 验证试验-18

2.9 发酵产物主要营养成分和生物活性成分分析-18

3 实验结果与讨论-19

3.1 发酵培养基的优化-19

3.1.1 碳源种类的选择-19

3.1.2 碳源含量的确定-20

3.1.3 氮源的选择-20

3.1.4 氮源含量的确定-21

3.2 发酵条件的优化-22

3.2.1 含水量的影响-22

3.2.2 发酵温度的影响发酵时间的影响-23

3.2.3 发酵时间的影响-23

3.2.4 培养基初始pH的影响-24

3.2.5 装瓶量的影响-25

3.2.6 发酵条件的正交试验-25

3.3 发酵产物营养成分与生物活性成分分析-26

致谢-29

参考文献-30